U盘可以直接插在电脑的USB接口上，对于台式电脑来说，USB接口在机箱背后和机箱正面都有可插入的接口。对于笔记本而言，USB接口主要在笔记本的两侧的位置，现在不少电脑带有USB3.0接口，在该接口中传输数据的效率更高。
USB接口不仅仅是U盘的专用接口，现在USB接口已经扩展到了许多的外设设备上，例如蓝牙接收器、鼠标、键盘和麦克风等等各种可以外接在电脑上的设备。在游戏、通信领域和手机等方面，USB接口也是一个重要的设备连接接口，可以说USB接口是一个规范式的标准插口。
u盘使用注意事项
在插入是需要注意方向，在遇到无法插入的情况，千万不要用力，换个方向就可以解决问题。并且在拔下后也不要马上接着就插入，等待5秒钟左右再插入。 有些U盘上有LED的指示灯，指示灯的明暗、闪烁等都反映了U盘不同的状态，一般来说指示灯只要是亮的时候都不能拔下U盘，这说明U盘在工作，强行拔出会造成损坏。
在进行完读写的操作后等待一会再拔出，这样比较安全。添加U盘后会在任务栏中多出USB设备的图标，打开该图标就会在列表中显示U盘设备，选择将该设备停用。然后再拔出设备，这样会比较安全。
U盘有USB接口，是USB设备。如果操作系统是WindowsXP/Vista/Win7/Linux/PrayayaQ3或是苹果系统的话，将U盘直接插到机箱前面板或后面的USB接口上，系统就会自动识别。如果系统是Windows 98的话，需要安装U盘驱动程序才能使用。驱动可以从附带的光盘中或者到生产商的网站上找到 。在一台电脑上第一次使用U盘（当你把U盘插到USB接口时）系统会发出一声提示音，然后报告“发现新硬件”。稍候，会提示：“新硬件已经安装并可以使用了”。（有时还可能需要重新启动）这时打开“我的电脑”，可以看到多出来一个硬盘图标，名称一般是U盘的品牌名，例如金士顿，名称就为KINGSTON。经过这一步后，以后再使用U盘的话，直接插上去，然后就可以打开“我的电脑”找到可移动磁盘，此时注意，在任务栏最右边，会有一个小图标，样子是一个灰色东西旁有一个绿色箭头，就是安全删除USB硬件设备的意思。（U盘是USB设备之一），接下来，你可以像平时操作文件一样，在U盘上保存、删除文件，或将文件通过右键直接发送到U盘中。
但是要注意，U盘使用完毕后要关闭所有关于U盘的窗口，拔下U盘前，要用左键双击右下角的安全删除USB硬件设备图标，再选择“停止”然后左键点击“确定”。当右下角出现提示：“USB设备现在可安全地从系统移除了”的提示后，才能将U盘从机箱上拔下，或者直接单击图标，直接点击“安全移除USB设备”,然后等出现提示后即可将U盘从机箱上拔下 。
