常用的质量控制的指标： 平均数法、RLE、NUSE和RNA降解曲线 根据以上指标综合决定实验是否合格，并提出质量不合格的样品。
可以看出，这个芯片的整体检查率并不太高，且GSE23740、GSM23745、GSM23746、GSM23750、GSM2375和GSM23757的RLE和NUSE偏离中心太多，整体RNA降解斜率偏低。在实际科研中，我们最好寻找高质量的芯片。
考虑到整体芯片质量不佳，过滤后剩余的样本数会比较少，下面就假装质量还可以进行下游分析（请大家谅解！）
当然affy包主要针对的是旧版的Affymetrix芯片，如hgu95/95和hgu133系列。下一篇我们来看看oligo包。
参考链接：
R语言_Affymetrix芯片数据处理
用affy包读取affymetix的基因表达芯片数据-CEL格式数据
使用oligo dT引物扩增的产物, 可以保证扩增产物包括mRNA的3'末端(减少rRNA的干扰), 但是oligo dT primer扩增有一个问题, 就是扩增片段的长度和扩增产物所包含的信息量的问题, 之所以有长度这个问题,一方面和lz所提到的RNA完整性有关,但最重要的限制在于逆转录酶的延伸能力. 用oligo dT primer扩增可能出现扩增出来的片段长度短, 虽然都有mRNA的3'端, 但是序列信息多位于3'-UTR附近, 若扩增序列太短,则有用信息很少, 不利于序列的识别和分析.使用random primer, 也有片段长度的限制, 但是由于它的逆转录并不一定在mRNA的末端起始, 而是在随机位置起始,所以它的扩增片段带有更多CDS的信息.但是如果是用总RNA逆转录的话,有可能会受到rRNA的干扰.
至于Gsp,只是在扩增已知gene/gene family以及部分原理的RACE中使用.
如果接下来你的PCR产物是外显子，就用oligo dT
如果是内含子或者包括部分内含子，就用random；
1 随机6具体引物：当特定M RNA含有使反转录酶终止的序列而难合成全长时可采用随机6具体引物来拷贝M RNA。用此引物合成的C DNA96%源与R RNA
2 oligo dt ：是一种对M RNA 特异的方法，因决大多数真核生物M RNA都有 POLY A结构，故仅M RNA被转录。做RT一般都用他做引物，特异性较强。
3 特异性引物：用含目标RNA的互补序列寡核甘酸做引物，可导致更为特异的扩增长物。
