香蕉束顶病毒病的理化性质是什么?

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香蕉束顶病毒病的理化性质是什么?,第1张

病毒名称:香蕉束顶病毒Bananabunchytopvirus(BBTV)。

分类地位:香蕉束顶病毒属Babuvirus,矮缩病毒科Nanoviridae。在国际病毒分类委员会(ICTV)中的编码为00.093.0.02.001。

病毒异名:Abacabunchytopvirus。

病毒提纯:提取液为0.2mol/L(pH7.4)磷酸钾缓冲液(含0.2%琉基乙醇和0.1%二乙基二硫氨基甲酸盐),1g病组织与2倍体积提取液混合,研磨后用两层纱布过滤,滤液经7000r/min低速离心15min后,上清液经36000r/min超速离心2.5h(Beckman45Ti转头),沉淀用适量0.07mol/L(pH7.2)磷酸钠缓冲液悬浮,于4℃搅拌2d并放置2d,悬浮液低速离心后取上清液再超速离心,其沉淀用小量0.07mol/L(pH7.2)磷酸钠缓冲液悬浮后进行硫酸铯密度梯度离心,分别测定各分部260nm的吸光度值及间接DAS-ELISA的490nm吸光度值,合并与BBTV抗体有免疫反应的部分,再经超速和低速交叉离心即可获纯化的BBTV制品。

另外的病毒提纯程序:病组织加入0.2mol/L(pH7.4)磷酸钾缓冲液(内含0.01mol/LEDTANa2,1%β-巯基乙醇)匀浆(3ml提取缓冲液/g病组织),匀浆液经两层纱布过滤,滤液中加入1/4体积的氯仿和正丁醇混合物(1∶1),置冰浴中搅拌乳化40min,6000r/min离心15min,于上清液相中加入3%NaCl和7%的PEG(分子量6000),4℃沉淀12h,8000r/min离心30min,弃上清液,用0.01mol/L(pH7.4)磷酸钾缓冲液溶沉淀,经9000r/min离心15min,其上清液相置MSE-75型超速离心机上40000r/min离心90min,以少量0.01mol/L(pH7.4)磷酸钾缓冲液回溶沉淀,8000r/min离心10min,去杂蛋白,其上清液相即为粗提取病毒液。粗提取病毒液经蔗糖密度梯度离心进一步纯化。蔗糖梯度为40%、30%、20%、10%,配制蔗糖梯度的缓冲液为0.01mol/L(pH7.4)磷酸钾缓冲液。于MSE-75型超速离心机上23000r/min离心3h,分步收取梯度液。

病毒理化特性:

①病毒粒子。圆形等轴20面体,直径18~20nm,也有报道为22~23nm,无包膜,粒子之间无特异性的排布。A260/A280为1.30~1.47。

②核酸。环状单链DNA,多分体病毒,含有至少6个大小在1.0~1.1kb的ssDNA组分,并分别包装在不同的病毒粒体内,分子质量2.0*106u。田娥等人首次完整报道了我国BBTV的6个DNA组分全序列。

③蛋白。分子质量为20ku。DNA1编码一个33.5ku的复制酶蛋白和一个15.2ku的未知蛋白,DNA3编码一个20ku的外壳蛋白,DNA4编码一个含30个氨基酸疏水区的蛋白,DNA5的编码蛋白与成视网膜瘤(Rb)蛋白有结合的活性,DNA6编码的蛋白起到一个核穿梭蛋白(NSP)的作用。而DNA2由于未找到一个合适的阅读框,认为该组分不编码任何蛋白。

株系:近来的研究表明,根据其基因组ssDNA的同源性可分为两类种群。一类是以菲律宾、越南和我国台湾分离物为代表的,在越南GiantCavendish(AAA)香蕉上发现的两种束顶症状,研究者把两者分别称为香蕉株系和马尼拉麻株系,后者造成叶片的不规则生长和明脉。马尼拉麻束顶病毒Abacabunchytopvirus,ABTV在菲律宾商业种植的麻蕉上产生的症状与BBTV相同,很可能是同一种病毒。ABTV在植株上产生黄化症状,通过香蕉交脉蚜非持久性传播。香蕉束顶病毒同样可以侵染马尼拉麻,并产生与ABTV相似的症状。

另一类则以澳大利亚、南太平洋、非洲和印度分离物为代表。云南分离物与澳大利亚的香蕉束顶病毒抗血清及中国台湾的单克隆抗体均呈阳性反应。

中国报道有4个株系。广东报道为NS和NSP株系,福建报道为S(重型)和M(轻型)株系。

香蕉线条病毒病:病原是香蕉线条病毒(BSV)。BSV侵染香蕉后可以产生多种症状,典型症状是叶片出现断续的和/或连续的褪绿条斑及梭条斑,随着症状的发展,可逐渐成为坏死黑色条斑。假茎、叶柄及果穗有时也会出现条纹症状。香蕉线条病与香蕉花叶病的症状非常相似,在田间易混淆,但该病在后期可以发展成为坏死条斑,从而加以区分。BSV侵染还可造成许多其他症状,如假茎内部坏死成为心腐,假茎基部肿大、假茎分开和生长排列不规则,叶皱缩卷曲、木栓化和叶片变窄等症状。症状严重时植株矮化,甚至不开花,即使开花结果,果穗小、果实不饱满。